Аннотация
Целью работы являлись оценка фармакокинетики лекарственного препарата Габитабс при однократной дозе 20 мг/кг. С помощью валидированных биоаналитических методик была определена концентрация габапентина, в плазме крови собак (80 образцов) методом ВЭЖХ-МС/МС. Анализ фармакокинетических параметров габапентина показал, что после однократного перорального введения препарата в дозировке 20 мг\кг собакам габапентин всасывается из желудочно-кишечного тракта со скоростью 0,17±0,03 ч-1 (Сmax/AUC0→t). Максимальная концентрация (Cmax) габапентина регистрировалась через 2,25±0,71 ч (Tmax). Величина максимальной концентрации составила 10,21±3,37 мкг/мл. Период полуэлиминации (T1/2) составляет 4,59±1,05 ч.
Ключевые слова
ВЭЖХ-МС/МС, фармакокинетика, габапентин
Введение
Действующее вещество − габапентин, является лекарственным средством, антиконвульсантом, которое используется в гуманной медицине для лечения эпилепсии и нейропатических болей. В ветеринарной практике габапентин используется для снижения стресса и тревожности у животных. Согласно Федеральному закону от 12.04.2010 № 61-ФЗ «Об обращении лекарственных средств» [1], исследование фармакокинетических показателей лекарственного средства является неотъемлемой частью изучения свойств лекарственного средства. Таким образом, нами была поставлена цель изучить фармакокинетику нового ветеринарного препарата Габитабс после однократного перорального приема препарата в дозировке 20 мг/кг.
Методы исследований
Фармакокинетические параметры определялись исходя из данных о концентрации препарата Габитабс в плазме крови собак после однократного перорального приема в дозе 20 мг/кг. Образцы плазмы крови собак были доставлены в замороженном виде в специальных транспортировочных контейнерах, заполненных хладагентом вместе с сопроводительной документацией.
Анализ фармакокинетических данных габапентина был произведен в соответствии с основными документами, регламентирующими объем, схему и процедуру проведения экспериментов [2, 3].
В качестве биологической матрицы для приготовления калибровочных стандартов и образцов контроля качества использовалась плазма крови собак без содержания исследуемого аналита.
Всего было проанализировано 80 образцов плазмы крови, полученные от 8 собак.
Анализ биологических образцов, полученных от субъектов исследования, проводили в соответствии с требованиями разработанной и валидированной методики. Перед началом анализа исследуемых образцов проводили процедуры контроля качества. Исследуемые образцы, образцы контроля качества (образцы QC) и калибровочные стандарты (калибраторы) готовили в соответствии с требованиями разработанной методики.
Количественное определение действующего вещества в плазме крови осуществляли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемной-масс-спектрометрией (ВЭЖХ-МС/МС) без внутреннего стандарта с диапазоном калибровки от 0,2 до 50 мкг/мл.
Основные фармакокинетические параметры рассчитаны модельно-независимым методом.
Все расчеты, представленные в виде таблиц и графиков, проводили с помощью автоматизированной компьютерной программы Phoenix WinNonlin, word, excel, statistica, PKSolver и других специализированных компьютерных программ на ПК.
Результаты
Из данных усредненного фармакокинетического профиля концентрации габапентина в плазме крови собак (рис. 1) мы видим, что среднее арифметическое значение достигло пиковых значений через 2 часа после перорального введения исследуемого препарата и составило 10,133±1,222 мкг/мл, после чего отмечается постепенное снижение данного показателя в течение изучаемого периода.
Рисунок 1 − Усредненный фармакокинетический профиль габапентина в плазме крови собак в линейных координатах
Анализ фармакокинетических параметров препарата на основе габапентина (табл. 1) показал, что после однократного перорального введения препарата в дозировке 20 мг/кг собакам действующее вещество всасывается из желудочно-кишечного тракта со скоростью 0,17±0,03 ч-1 (Сmax/AUC0→t). Фармакокинетические параметры оценивали по результатам исследования концентрации габапентина на протяжении 36 часов. Концентрации габапентина в плазме крови собак спустя 36 часов после приема препарата были ниже нижнего предела количественного обнаружения методики (менее 0,2 мкг/мл), в связи с этим фармакокинетические параметры рассчитывались с использованием временной точки 24 ч после приема как конечной.
Максимальная концентрация (Cmax) габапентина, равная 10,21±3,37 мкг/мл, регистрировалась через 2,25±0,71 ч (Tmax). Данные значения показывают, что габапентин всасывается в системный кровоток из желудочно-кишечного тракта с умеренной скоростью. Период полуэлиминации (T1/2) составляет 4,59±1,05 ч, что свидетельствует о средднесрочном нахождении исследуемого вещества в системном кровотоке животных. Данный факт подтверждается средним значением удерживания вещества в организме (MRT), которое составило 6,46±1,26 ч.
Таблица 1 − Фармакокинетические параметры для действующего вещества в плазме крови собак
| № животного | T1/2 | Tmax | Cmax | AUC0-t | AUC0-∞ | MRT | kel |
Сmax/ AUC0→t |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| ч | ч | мкг/мл | мкг/мл´ч | мкг/мл´ч | ч | (ч-1) | (ч-1) | |
| 1 | 3,91 | 2,00 | 13,28 | 84,52 | 85,98 | 6,45 | 0,18 | 0,16 |
| 2 | 4,19 | 2,00 | 12,84 | 79,40 | 81,69 | 6,25 | 0,17 | 0,16 |
| 3 | 3,68 | 2,00 | 13,98 | 56,50 | 57,65 | 4,50 | 0,19 | 0,25 |
| 4 | 3,76 | 2,00 | 12,98 | 71,71 | 73,10 | 4,96 | 0,18 | 0,18 |
| 5 | 5,51 | 2,00 | 5,81 | 32,23 | 35,04 | 8,50 | 0,13 | 0,18 |
| 6 | 6,74 | 4,00 | 6,85 | 47,79 | 50,55 | 7,09 | 0,10 | 0,14 |
| 7 | 4,20 | 2,00 | 7,53 | 54,67 | 55,99 | 6,93 | 0,17 | 0,14 |
| 8 | 4,77 | 2,00 | 8,37 | 46,46 | 49,02 | 7,00 | 0,15 | 0,18 |
| Mean | 4,59 | 2,25 | 10,21 | 59,16 | 61,13 | 6,46 | 0,16 | 0,17 |
| Gmean | 4,50 | 2,18 | 9,69 | 56,67 | 58,85 | 6,34 | 0,15 | 0,17 |
| Медиана | 4,19 | 2,00 | 10,61 | 55,58 | 56,82 | 6,69 | 0,17 | 0,17 |
| Минимум | 3,68 | 2,00 | 5,81 | 32,23 | 35,04 | 4,50 | 0,10 | 0,14 |
| Максимум | 6,74 | 4,00 | 13,98 | 84,52 | 85,98 | 8,50 | 0,19 | 0,25 |
| SD | 1,05 | 0,71 | 3,37 | 17,94 | 17,57 | 1,26 | 0,03 | 0,03 |
| CV (%) | 22,95 | 31,43 | 33,01 | 30,33 | 28,75 | 19,58 | 19,16 | 19,73 |
Вывод
Полеченные нами данные по фармакокинетике габапентина, продолжительности его нахождения в организме собак, скорости его выведения позволяют прогнозировать время наступления терапевтического эффекта препарата, интервалы его введения при курсовом назначении в клинической ветеринарной практике.
- Приказ Министерства сельского хозяйства Российской Федерации № 101 от 6 марта 2018 г. «Об утверждении правил проведения доклинического исследования лекарственного средства для ветеринарного применения, клинического исследования лекарственного препарата для ветеринарного применения, исследования биоэквивалентности лекарственного препарата для ветеринарного применения»
- Руководство по экспериментальному доклиническому изучению новых фармакологических веществ / под ред. Р. У. Хабриева − 2 изд., перераб. и доп. − М.: Медицина, 2005 − 832 с.
- Руководство по экспертизе лекарственных средств / под ред. Миронова А. Н. − М.: Полиграф-Плюс, 2014. − 344 с.
