Эффективность препарата Гельмимакс® при дирофиляриозе охотничьих собак в условиях Краснодарского края

611

Содержание:


В статье представлены результаты изучения эффективности микрофилярицидной терапии с моксидектин-содержащим препаратом Гельмимакс® у охотничьих собак в стационарно неблагополучном по трансмиссивному заболеванию регионе. Исследование было проведено в течение 12 месяцев, продолжительность терапии составила более 6 месяцев. Оценка эффективности проводилась на основании результатов ПЦР-диагностики, проводимой каждые 6 месяцев. Были получены данные по эффективности микрофилярицидного действия моксидектина у собак с подтвержденным диагнозом на Dirofilaria immitis и Dirofilaria repens в режиме ежемесячной терапии. Профилактическое защитное действие также было определено для препарата Гельмимакс® в сравнении с традиционной ежеквартальной дегельминтизацией празиквантел + пирантел + фебантел содержащим препаратом (зарегистрированное торговое наименование — Дирофен® таблетки) составила 100%, независимо от метода выявления.

Ключевые слова: дирофиляриоз, охотничьи собаки, выживаемость, микрофилярицид, ПЦР, моксидектин.

К.В. Сидронина, ветеринарный врач, аспирант кафедры паразитологии (kv.sidronina@gmail.com), ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина» (350044, Россия, г. Краснодар, ул. Калинина, 13)

О.В. Петрова, кандидат ветеринарных наук, ветеринарный врач (farmnadzor@apicenna.ru), ООО «Апиценна» (адрес для корреспонденции: 143980, Московская обл., г. Железнодорожный, ул. Пролетарская, д.2, а/я 584)

Сокращения: ДВ — действующее вещество, ПЦР — полимеразно-цепная реакция.

Введение

Дирофиляриоз — широко распространенное заболевание собак и кошек Возбудителями дирофиляриоза домашних животных служат круглые гельминты Dirofilaria immitis (D.immitis), локализующиеся в правом желудочке и легочных артериях и Dirofilaria repens (D.repens), паразитирующие в подкожной клетчатке. Паразитируя в сердце собак и кошек, дирофилярии вызывают расстройства кровообращения в результате механической закупорки и эндокардита, клинически проявляющегося расстройством сердечной деятельности. Дирофиляриоз является трансмиссивным заболеванием. Развитие возбудителей дирофиляриоза происходит с участием промежуточного хозяина — комаров родов Aedes, Culex, Anophelus. Изучением дирофиляриоза у собак в России занимались исследователи [1–6]. Из их научных работ стало известно, что препараты для борьбы с дирофиляриозом можно разделить на макро- и микро- филярициды. Основной для микрофилярицидной терапии является применение макроциклических лактонов. Макроциклические лактоны (ML) используются более 30 лет для эффективной и безопасной защиты собак от сердечного червя в форме спот-он, инъекционного раствора и пероральных таблеток [10–12, 14–17, 19].

Учитывая тот факт, что клинические признаки дирофиляриоза часто являются неспецифическими, решающее значение при постановке диагноза имеют лабораторные исследования, с целью выявления в крови микрофилярий или специфических для паразита антигенов. Диагностика дирофиляриоза занимает ведущее место в системе мероприятий, направленных на лечение и профилактику заболевания. Наибольшего внимания заслуживают методы прижизненной диагностики, позволяющие предупредить распространение инвазии и существенно снизить затраты на содержание зараженных животных. Поскольку виды D.immitis и D.repens обладают разной степенью патогенности по отношению к хозяину, очень важна дифференциальная видовая диагностика. Для диагностики «скрытой» инвазии, а также для изучения эффективности макрофилярицидной терапии применяются иммунологические методы диагностики по выявлению специфических антигенов или антител в сыворотке крови собак. Много работ посвящено изучению дирофиляриоза, в том числе в условиях южных стационарно-неблагополучных регионов. Однако, совершенствование клинико-диагностического подхода к проблеме дирофиляриоза у животных, находящихся в условиях повышенного риска заражения, невозможно без получения объективных данных по эффективности отдельных микрофилярицидов на статистически значимом количестве животных.

Цель работы

Изучить эффективность препарата «Гельмимакс»® в борьбе с дирофиляриозом охотничьих собак в условиях Краснодарского края.

Материалы и методы

Работа выполнена на базе ветеринарного центр помощи животным «ВиТа» при участии кафедры паразитологии ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина». Лабораторную диагностику проводили в сети VET UNION, группы компаний INVITRO. Объектами исследования служили разнополые собаки (n = 257) в возрасте от 7 месяцев до 16 лет. Диагноз «дирофиляриоз» ставили на основании клинических признаков и выявления антигена D.immitis и D.repens в ПЦР из образцов венозной крови животных. Дополнительно использовались и другие методы прижизненной диагностики дирофиляриоза — методы Кнотта, Ястреба, гематокритный и прямой микроскопии по стандартным методикам, прописанным в регламентах [8, 9, 13, 18]. После проведения клинико-лабораторного обследования животных, получения статуса в отношении возбудителя дирофиляриоза, собак делили на группы: опытная группа №1 — это здоровые животные, получающие исследуемый препарат Гельмимакс® с профилактической целью (n = 101), контрольная группа №2 — здоровые животные, получающие Дирофен® таблетки с профилактической целью (n = 102), опытная группа №3 — больные животные, которые получали Гельмимакс®  для контроля микрофиляриемии ежемесячно (n = 55). Контрольная группа не получала микрофилярицидов; в опытных группах, в качестве разрешенной, использовалась терапия только с исследуемым препаратом Гельмимакс®.

ВНИМАНИЕ

Названия препаратов приведены в информационных целях.

Любые лекарства допустимо давать питомцу только по назначению ветеринарного врача.


Препарат Гельмимакс® применяли в дозе, строго рассчитанной количественно в мг моксидектина на кг массы тела животного, измеренного после каждого визита в клинику по плану исследования, ориентируясь на рекомендации производителя: не более 0,25 мг/кг массы тела по ДВ. В группе контроля препарат Дирофен® таблетки применяли ежеквартально в дозе 1 таблетка на 20 кг массы тела перорально в утреннее кормление животных. 


Условия содержания экспериментальных животных: см. рисунок 1.

Рис. 1. Содержание животных в эксперименте

Кровь для исследования на наличие микрофилярий от собак получали в 0 день, а затем каждые 6 месяцев мониторинга.

Полученные данные подвергали статистической обработке с помощью программы «AnalystSoftInc», «STATPLUS», версия 2009. Различия расценивали как достоверные при р ≤ 0,05.

Результаты

Среди собак (n = 55), у которых выявляли D. immitis и D.repens не удалось выявить четкой половой и породной чувствительности к инвазии. Интересно, что у молодых собак заболевание регистрировалось значительно чаще. Возрастная динамика заболевания отмечена в таблице 1.

Породное распределение дирофилириоза среди охотничьих собак было следующим: 12,7 % случаев приходилось на курцхааров, 10,9 % — на русских пегих гончих, по 9,1 % — на немецких овчарок и такс, по 5,4 % — на дратхааров, лаек и пекинесов, на остальные породы и метисов приходилось менее 5 % (хаски, эстонская гончая, спаниель, поинтер, питбуль, бретонский эпаньоль, лайка, ирландский сеттер, московская сторожевая, подголянская овчарка, среднеазиатская овчарка).

Таблица 1. Распределение собак по возрастам выявленных случаев дирофиляриоза

 

Возраст животных

До года От года до 3 лет 4 года 5 лет 6 лет 7 лет 8 лет 9 лет 10 лет

Количество животных с положительным диагнозом на дирофиляриоз

2

19

11

5

2

3

1

4

5

Важно понимать, что в отношении Dirofilaria spp. необходимо дифференцировать возбудителя, так как для D.immitis и D.repens видов существует разная патогенность для организма и клиническое значение. На основании результатов первичной диагностики методом ПЦР нам удалось выявить, что у 14,5 % собак наблюдается сочетанная инвазия D.immitis и D.repens. У большинства собак находили только один вид — D.immitis. У одной особи выявили инвазию подкожного вида D.repens. Наличие сочетанной инвазии у собак не оказывало существенного влияния на тяжесть клинических проявлений дирофиляриоза. У 6 из 7 животных при сочетанной инвазии (85,7 %) отмечали снижение активности, плохую упитанность, низкий исходный вес по сравнению с нормальным физиологическим, характерным для породы и пола. У больных дирофиляриозом собак шерсть при осмотре была тусклой и редкой, аппетит был снижен. Однако, у 16 (28 %) обследованных нами собак мы не выявили патологического изменения массы тела, отклонений в упитанности и активности, а у 9 собак (15,8 %) и вовсе не отмечалось никаких клинических симптомов. У трети собак с диагнозом дирофиляриоз не отмечали снижения аппетита.

Для понимания патогенеза заболевания владельцы животных были опрошены на предмет продолжительности отмечаемого ими ухудшения клинического состояния их питомцев, а именно: снижение аппетита, признаков анемии, нарушения сердечно-сосудистого кровотока, вызванного гельминтами. У 5 собак клиническая картина нарастания дирофиляриоза наблюдалась за 6 месяцев до первичного ПЦР теста, за 12 месяцев — у 7 собак, за 18 месяцев — у 5 собак, за 2 года — у 4 собак, за 3 года — у 2 собак. Таким образом, для большинства собак характерно, что клиническая картина хронического дирофиляриоза развивалась у них в течение 12 месяцев.

Собаки, получая ежемесячно микрофилярицидную экспериментальную терапию, давали четкую и выраженную картину улучшения — нормализацию аппетита, восстановление активности и выносливости при выполнении служебных команд. Состояние шерсти и кожи улучшалось на фоне приема препарата к концу второго — началу третьего месяца мониторинга.

Расчет эффективности микрофилярицидного действия препарата проводили по соотношению особей с отрицательным диагностическим тестом ПЦР к общему числу животных на конец исследования. Эффективность составила 50/52 = 96,15 % за 12 месяцев наблюдения и 6-кратного введения препарата Гельмимакс®. Также нами была подсчитана выживаемость животных с дирофиляриозом при применении терапии с препаратом Гельмимакс®, которая составила 94,5 % (52 : 55 * 100 %). Из 55 собак с подтвержденным ПЦР тестом на дирофиляриоз у 50 животных были дополнительно исследованы образцы крови (использовались другие широко известные методы выявления микрофилярий: по Кнотту, Ястребу, гематокритному методу и методу прямой микроскопии). Данные занесены в таблицу 2.

Летальность в эксперименте объясняется возрастными причинами и соматическими патологиями, которые не были связаны с неэффективностью экспериментальной терапии в исследовании (рис. 2).

Полученные данные сравнения разных методов тестирования животных на дирофиляриоз убедительно показали высокую диагностическую эффективность и чувствительность ПЦР метода на ранних сроках заболевания, в частности, выявляемость патологии у животных до трехлетнего возраста в 3,5 раза чаще, чем традиционным методом Кнотта. Таким образом, используя в исследовании результаты ПЦР-диагностики, как критерий эффективности микрофилярицида, удалось получить реальный и объективный результат. Также можно сказать, что для рутинных процедур по тестированию животных на дирофиляриоз ПЦР диагностика может использоваться на постоянной основе в ветеринарных клиниках.

В рамках текущих задач мы оценили защитное, профилактическое действие  микрофилярицида на клинически здоровых собаках, которые не давали положительного ПЦР теста на дирофиляриоз.

Таблица 2. Ранняя лабораторная диагностика дирофиляриоза собак

Методы диагностики

Возраст животных

до года от 1 до3 лет 4 года 5 лет 6 лет 7 лет 8 лет 9–10 лет
ПЦР 2 14 10 8 2 3 1 10
Метод Кнотта - 4 5 7 2 3 1 10
Гематокритный метод - 1 3 4 2 3 1 10
Метод Ястреба - 4 5 7 2 3 1 10
Прямая микроскопия - - 2 1 2 3 1 10

Рис. 2. Результаты патологоанатомической экспертизы

За годовое исследование в опытной группе была подсчитана эффективность обработки животных Гельмимакс® в разрешенной дозе 0,25 мг/кг ежемесячно. Эффективность Гельмимакс® равна 100/101 = 100 % по ПЦР, и дополнительно эффективность методом Кнотта оценена как 101/101 = 100 % при повторном анализе образцов крови, взятых от тех же животных для сравнения. Только одна собака из 101 испытуемых демонстрировала положительный результат на дирофиляриоз по методу ПЦР.

В группе контроля с препаратом Дирофен® таблетки мы получили расхождение.

Эффективность Дирофен® таблетки: 95/102 = 93,13 % в течение 12 месяцев наблюдения в режиме ежеквартальной обработки животных.

В контрольной группе 7 собак, не получавших микрофилярицида заразились дирофиляриозом в период исследования. Гельмимакс® объективно защищает животных от заражения дирофиляриозом при использовании, согласно инструкции. Среди заразившихся собак, которые не получали микрофилярицида, были метисы, гончая, немецкая овчарка, грейхаунд и среднеазиатская овчарка. Важно отметить, что клинически инвазированность их D.immitis никак не проявлялась, животные были визуально здоровы, имели хороший аппетит и упитанность, признаков сердечной недостаточности не наблюдалось. Во время продолжительного применения таблеток Гельмимакс® у 55 больных животных и, с профилактической целью у 101 здорового, побочных эффектов терапии не установлено. У экспериментальных собак не выявлено нарушений стула, нервных расстройств или изменений поведения. Для собак с подтвержденным диагнозом после окончания основного исследования была дана рекомендация по дальнейшему применению препарата Гельмимакс® из расчета 0,25 мг/кг массы тела ежемесячно с контролем по ПЦР не реже 1–2 раз в год.

Обсуждение

В нашем исследовании эффективность профилактического действия препарата Гельмимакс®, в зависимости от метода обнаружения, достигала 99–100 %. Животные, которые заражались дирофиляриозом в течение 6–9 месяцев исследования, не имели клинических проявлений заболевания. Эффективность микрофилярицидного действия препарата составила 96,15 %. Выживаемость животных с диагнозом дирофиляриоз в ходе наблюдения за 12 месяцев составила 94,5 %. В группе собак, получавших Гельмимакс® в профилактических целях, летальности или выбытия не отмечалось. При многократном введении препаратов Дирофен® таблетки и Гельмимакс® нежелательных реакций и побочного действия в ходе ежемесячных клинических наблюдений не установлено. В патогенезе самого заболевания не установлено четкой половой или породной предрасположенности, однако, чаще микрофилярий находили у молодых животных < 3 лет. При продолжительном течении инвазии клиническая картина сердечной недостаточности постепенно нарастала и характеризовалась появлением анемии, тусклой шерсти, вялости, потерей активности и физической выносливости. В нашем исследовании установлена инвазия не только D.immitis, но и D.repens. Частота выявления D.repens составила 9 из 55 положительных на дирофиляриоз. Состояние животных при использовании микро- филярицидной терапии объективно улучшалось на второй — третий месяц. Применение препарата Дирофен® таблетки не защищало собак от дирофиляриоза. Также, изучая чувствительность методов тестирования животных на наличие у них микрофилярий, ПЦР-диагностика является наиболее точным и клинически оправданным методом детектирования паразита, особенно на ранних этапах заражения у молодых животных.

Выводы

Включение препарата Гельмимакс® в схему лечения собак, больных дирофиляриозом, для контроля выделения микрофилярий позволило с успехом бороться с клиническими проявлениями инвазии, а также получило положительные рекомендации для защиты животных от заражения возбудителями D.immitis и D.repens. Мониторинг микрофиляремии с помощью ПЦР метода является эффективным инструментом для борьбы с дирофиляриозом у молодых собак.

Конфликт интересов

Производителем препаратов Гельмимакс® и «Дирофен® таблетки для ветеринарного применения и спонсором данного исследования является ООО «Апиценна». Решение о публикации результатов научной работы принадлежит разработчику ООО «АПИ-САН».

Библиография

1. Архипов И.А. Дирофиляриоз / И.А. Архипов, Д.Р. Архипова. — Москва: Типография Россельхозакадемии, 2004.–194 с.

2. Беспалова Н. С. Сравнительная характеристика микрофилярицидных свойств препаратов на основе моксидектина и эприномектина при дирофиляриозах собак /Н. С. Беспалова, Т. А. Золотых // Актуальные проблемы и инновации в современной ветеринарной фармакологии и токсикологии: Материалы V междунар. съезда ветеринарных фармакологов и токсикологов. — Витебск: ВГАВМ, 2015. — С. 86–88.

3. Ястреб В.Б. //Сб.мат.науч.конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». -2004. — вып.5.- С. 443–445.

4.  Веденеев С.А. Новые подходы к проблемам лечения и профилактики дирофиляриоза собак / С.А. Веденеев, В.Н. Ямщиков // Актуальные проблемы биологии и ветеринарной медицины мелких домашних животных: Материалы междунар. научно–практической конф. — Троицк: УГАВМ, 2005. — С. 182–186.

5. Винокурова Д.П. Распространение и патоморфология дирофиляриоза у собак и кошек в Краснодарском крае и морфология дирофилярий: автореф. дис….канд. вет. наук: 102 03.02.11; 06.02.01 / Винокурова Диана Петровна. — Ставрополь, 2011.–20 с.

6. Гаркави Б.Л. Распространение дирофиляриоза домашних собак в Краснодаре /Б.Л. Гаркави, Ф.С. Михно // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: Матер. докл. науч. конф. — Москва: ВИГИС, 2002. — Выпуск 3.–С. 91.

7. Золотых Т.А. Дирофиляриоз собак в Воронеже и Воронежской области / Т.А. Золотых, Н.С. Беспалова // Российский паразитологический журнал, 2015.–№ 2. — С. 38–42.

8.  Золотых Т.А. Клинические исследования терапевтической эффективности препарата «Гельмимакс» при гельминтозах собак и кошек / Т.А. Золотых, Е.Н. Канапелько //Вопросы нормативно–правового регулирования в ветеринарии, 2016. — № 2. — С. 139–143.

9.  Ястреб В.Б. //Сб.мат.науч.конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». — 2004. — вып.5.- С. 443–445.

10. Atkins CE. Comparison of results of three commercial heartworm antigen test kits in dogs with low heartworm burdens. J Am Vet Med Assoc. 2003;222:1221–1223. doi: 10.2460/javma.

11. Arther RG, Bowman DD, Slone RL, Travis LE. Imidacloprid plus moxidectin topical solution for the prevention of heartworm disease (Dirofiloria immitis) in dogs. Parasitol Res. 2005;97(Suppl. 1):S76–80.

12.  Bowman DD, Grazette AR, Basel C, Wang Y, Hostetler JA. Pro- tection of dogs against canine heartworm infection 28 days after four monthly treatments with Advantage Multi® for Dogs. Parasit Vectors. 2016;9:12.

13. Bowman DD, Ohmes CM, Hostetler JA, Keil DJ, Settje TL, Charles SD. Efficacy of 10 % imidacloprid + 2.5 % moxidectin topical solution (Advantage Multi® for Dogs) for the prevention of heartworm disease and infection all month long. Parasit Vectors. 2017;10(Suppl. 2):478.

14.  Knott J.I. // Trans. Roy. Soc. Trop. Med. Hyg. — 1939. — V. 33. — P. 191–196.

15. Lok JB, Knight DH, McCall JW, Dzimianski MT, Cleale RM, Wang GT, et al. Six-month prophylactic efficacy of an injectable, sustained- release formulation of moxidectin against Dirofilaria immitis infection: a two-center study. Recent advances in heartworm disease-symposium ʼ01. Batavia: American Heartworm Society; 2001. p. 149–57.

16. Lok JB, Knight DH, Wang GT, Doscher ME, Nolan TJ, Hendrick MJ, et al. Activity of an injectable, sustained-release formulation of moxidectin administered prophylactically to mixed-breed dogs to prevent infection with Dirofilaria immitis. Am J Vet Res. 2001;62:1721–6

17.  McCall JW, Lindemann BA, Porter CA. Prophylactic activity of avermectins against experimentally induced Dirofilaria immitis in dogs. In: Proceedings of the heartworm symposium ʼ80. Edwardsville: Veteri- nary Medicine Publishing Co.; 1980. p. 126–30.

18. McCall JW, McTier TL, Holmes RA, Greene T, Strickland J, Aguilar R. Prevention of naturally acquired heartworm infection in heartworm- negative beagles by oral administration of moxidectin at an interval of either one or two months. In: Proceedings of the Heartworm Symposium ʼ92. Batavia: American Heartworm Society; 1992. p. 169–77.

19. McCall JW, Suprakorndej BS, Donoghue AR, Turnbull RK. Evalu- ation of the performance of canine heartworm antigen test kits licensed for use by veterinarians and canine heartworm antigen tests conducted by diagnostic laboratories. In: Seward LE, Knight DH, editors. Recent Ad- vances in Heartworm Disease Symposium ’01. Batavia, Illinois: American Heartworm Society; 2001. pp. 135–140.

20. Snyder DE, Wiseman S, Bowman DD, McCall JW, Reinemeyer CR. Assessment of the effectiveness of a combination product of spinosad and milbemycin oxime on the prophylaxis of canine heartworm infection. Vet Parasitol. 2011;180:262–6.

Петрова Ольга Владиславовна
Автор статьи
Ветеринарный врач ООО «Апиценна»,
кандидат ветеринарных наук
Была ли статья полезной?
Назад к списку