Эффективность препарата Гельмимакс® при дирофиляриозе охотничьих собак в условиях Краснодарского края

В статье представлены результаты изучения эффективности микрофилярицидной терапии с моксидектин-содержащим препаратом Гельмимакс® у охотничьих собак в стационарно неблагополучном по трансмиссивному заболеванию регионе. Исследование было проведено в течение 12 месяцев, продолжительность терапии составила более 6 месяцев. Оценка эффективности проводилась на основании результатов ПЦР-диагностики, проводимой каждые 6 месяцев. Были получены данные по эффективности микрофилярицидного действия моксидектина у собак с подтвержденным диагнозом на Dirofilaria immitis и Dirofilaria repens в режиме ежемесячной терапии. Профилактическое защитное действие также было определено для препарата Гельмимакс® в сравнении с традиционной ежеквартальной дегельминтизацией празиквантел + пирантел + фебантел содержащим препаратом (зарегистрированное торговое наименование — Дирофен® таблетки) составила 100%, независимо от метода выявления.

Ключевые слова: дирофиляриоз, охотничьи собаки, выживаемость, микрофилярицид, ПЦР, моксидектин.

К.В. Сидронина, ветеринарный врач, аспирант кафедры паразитологии (kv.sidronina@gmail.com), ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина» (350044, Россия, г. Краснодар, ул. Калинина, 13)

О.В. Петрова, кандидат ветеринарных наук, ветеринарный врач (farmnadzor@apicenna.ru), ООО «Апиценна» (адрес для корреспонденции: 143980, Московская обл., г. Железнодорожный, ул. Пролетарская, д.2, а/я 584)

Сокращения: ДВ — действующее вещество, ПЦР — полимеразно-цепная реакция.

Введение

Дирофиляриоз — широко распространенное заболевание собак и кошек Возбудителями дирофиляриоза домашних животных служат круглые гельминты Dirofilaria immitis (D.immitis), локализующиеся в правом желудочке и легочных артериях и Dirofilaria repens (D.repens), паразитирующие в подкожной клетчатке. Паразитируя в сердце собак и кошек, дирофилярии вызывают расстройства кровообращения в результате механической закупорки и эндокардита, клинически проявляющегося расстройством сердечной деятельности. Дирофиляриоз является трансмиссивным заболеванием. Развитие возбудителей дирофиляриоза происходит с участием промежуточного хозяина — комаров родов Aedes, Culex, Anophelus. Изучением дирофиляриоза у собак в России занимались исследователи [1–6]. Из их научных работ стало известно, что препараты для борьбы с дирофиляриозом можно разделить на макро- и микро- филярициды. Основной для микрофилярицидной терапии является применение макроциклических лактонов. Макроциклические лактоны (ML) используются более 30 лет для эффективной и безопасной защиты собак от сердечного червя в форме спот-он, инъекционного раствора и пероральных таблеток [10–12, 14–17, 19].

Учитывая тот факт, что клинические признаки дирофиляриоза часто являются неспецифическими, решающее значение при постановке диагноза имеют лабораторные исследования, с целью выявления в крови микрофилярий или специфических для паразита антигенов. Диагностика дирофиляриоза занимает ведущее место в системе мероприятий, направленных на лечение и профилактику заболевания. Наибольшего внимания заслуживают методы прижизненной диагностики, позволяющие предупредить распространение инвазии и существенно снизить затраты на содержание зараженных животных. Поскольку виды D.immitis и D.repens обладают разной степенью патогенности по отношению к хозяину, очень важна дифференциальная видовая диагностика. Для диагностики «скрытой» инвазии, а также для изучения эффективности макрофилярицидной терапии применяются иммунологические методы диагностики по выявлению специфических антигенов или антител в сыворотке крови собак. Много работ посвящено изучению дирофиляриоза, в том числе в условиях южных стационарно-неблагополучных регионов. Однако, совершенствование клинико-диагностического подхода к проблеме дирофиляриоза у животных, находящихся в условиях повышенного риска заражения, невозможно без получения объективных данных по эффективности отдельных микрофилярицидов на статистически значимом количестве животных.

Цель работы

Изучить эффективность препарата «Гельмимакс»® в борьбе с дирофиляриозом охотничьих собак в условиях Краснодарского края.

Материалы и методы

Работа выполнена на базе ветеринарного центр помощи животным «ВиТа» при участии кафедры паразитологии ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина». Лабораторную диагностику проводили в сети VET UNION, группы компаний INVITRO. Объектами исследования служили разнополые собаки (n = 257) в возрасте от 7 месяцев до 16 лет. Диагноз «дирофиляриоз» ставили на основании клинических признаков и выявления антигена D.immitis и D.repens в ПЦР из образцов венозной крови животных. Дополнительно использовались и другие методы прижизненной диагностики дирофиляриоза — методы Кнотта, Ястреба, гематокритный и прямой микроскопии по стандартным методикам, прописанным в регламентах [8, 9, 13, 18]. После проведения клинико-лабораторного обследования животных, получения статуса в отношении возбудителя дирофиляриоза, собак делили на группы: опытная группа №1 — это здоровые животные, получающие исследуемый препарат Гельмимакс® с профилактической целью (n = 101), контрольная группа №2 — здоровые животные, получающие Дирофен® таблетки с профилактической целью (n = 102), опытная группа №3 — больные животные, которые получали Гельмимакс®  для контроля микрофиляриемии ежемесячно (n = 55). Контрольная группа не получала микрофилярицидов; в опытных группах, в качестве разрешенной, использовалась терапия только с исследуемым препаратом Гельмимакс®.

Препарат Гельмимакс® применяли в дозе, строго рассчитанной количественно в мг моксидектина на кг массы тела животного, измеренного после каждого визита в клинику по плану исследования, ориентируясь на рекомендации производителя: не более 0,25 мг/кг массы тела по ДВ. В группе контроля препарат Дирофен® таблетки применяли ежеквартально в дозе 1 таблетка на 20 кг массы тела перорально в утреннее кормление животных. 

Условия содержания экспериментальных животных: см. рисунок 1.

Рис. 1. Содержание животных в эксперименте

Кровь для исследования на наличие микрофилярий от собак получали в 0 день, а затем каждые 6 месяцев мониторинга.

Полученные данные подвергали статистической обработке с помощью программы «AnalystSoftInc», «STATPLUS», версия 2009. Различия расценивали как достоверные при р ≤ 0,05.

Результаты

Среди собак (n = 55), у которых выявляли D. immitis и D.repens не удалось выявить четкой половой и породной чувствительности к инвазии. Интересно, что у молодых собак заболевание регистрировалось значительно чаще. Возрастная динамика заболевания отмечена в таблице 1.

Породное распределение дирофилириоза среди охотничьих собак было следующим: 12,7 % случаев приходилось на курцхааров, 10,9 % — на русских пегих гончих, по 9,1 % — на немецких овчарок и такс, по 5,4 % — на дратхааров, лаек и пекинесов, на остальные породы и метисов приходилось менее 5 % (хаски, эстонская гончая, спаниель, поинтер, питбуль, бретонский эпаньоль, лайка, ирландский сеттер, московская сторожевая, подголянская овчарка, среднеазиатская овчарка).

Важно понимать, что в отношении Dirofilaria spp. необходимо дифференцировать возбудителя, так как для D.immitis и D.repens видов существует разная патогенность для организма и клиническое значение. На основании результатов первичной диагностики методом ПЦР нам удалось выявить, что у 14,5 % собак наблюдается сочетанная инвазия D.immitis и D.repens. У большинства собак находили только один вид — D.immitis. У одной особи выявили инвазию подкожного вида D.repens. Наличие сочетанной инвазии у собак не оказывало существенного влияния на тяжесть клинических проявлений дирофиляриоза. У 6 из 7 животных при сочетанной инвазии (85,7 %) отмечали снижение активности, плохую упитанность, низкий исходный вес по сравнению с нормальным физиологическим, характерным для породы и пола. У больных дирофиляриозом собак шерсть при осмотре была тусклой и редкой, аппетит был снижен. Однако, у 16 (28 %) обследованных нами собак мы не выявили патологического изменения массы тела, отклонений в упитанности и активности, а у 9 собак (15,8 %) и вовсе не отмечалось никаких клинических симптомов. У трети собак с диагнозом дирофиляриоз не отмечали снижения аппетита.

Для понимания патогенеза заболевания владельцы животных были опрошены на предмет продолжительности отмечаемого ими ухудшения клинического состояния их питомцев, а именно: снижение аппетита, признаков анемии, нарушения сердечно-сосудистого кровотока, вызванного гельминтами. У 5 собак клиническая картина нарастания дирофиляриоза наблюдалась за 6 месяцев до первичного ПЦР теста, за 12 месяцев — у 7 собак, за 18 месяцев — у 5 собак, за 2 года — у 4 собак, за 3 года — у 2 собак. Таким образом, для большинства собак характерно, что клиническая картина хронического дирофиляриоза развивалась у них в течение 12 месяцев.

Собаки, получая ежемесячно микрофилярицидную экспериментальную терапию, давали четкую и выраженную картину улучшения — нормализацию аппетита, восстановление активности и выносливости при выполнении служебных команд. Состояние шерсти и кожи улучшалось на фоне приема препарата к концу второго — началу третьего месяца мониторинга.

Расчет эффективности микрофилярицидного действия препарата проводили по соотношению особей с отрицательным диагностическим тестом ПЦР к общему числу животных на конец исследования. Эффективность составила 50/52 = 96,15 % за 12 месяцев наблюдения и 6-кратного введения препарата Гельмимакс®. Также нами была подсчитана выживаемость животных с дирофиляриозом при применении терапии с препаратом Гельмимакс®, которая составила 94,5 % (52 : 55 * 100 %). Из 55 собак с подтвержденным ПЦР тестом на дирофиляриоз у 50 животных были дополнительно исследованы образцы крови (использовались другие широко известные методы выявления микрофилярий: по Кнотту, Ястребу, гематокритному методу и методу прямой микроскопии). Данные занесены в таблицу 2.

Летальность в эксперименте объясняется возрастными причинами и соматическими патологиями, которые не были связаны с неэффективностью экспериментальной терапии в исследовании (рис. 2).

Полученные данные сравнения разных методов тестирования животных на дирофиляриоз убедительно показали высокую диагностическую эффективность и чувствительность ПЦР метода на ранних сроках заболевания, в частности, выявляемость патологии у животных до трехлетнего возраста в 3,5 раза чаще, чем традиционным методом Кнотта. Таким образом, используя в исследовании результаты ПЦР-диагностики, как критерий эффективности микрофилярицида, удалось получить реальный и объективный результат. Также можно сказать, что для рутинных процедур по тестированию животных на дирофиляриоз ПЦР диагностика может использоваться на постоянной основе в ветеринарных клиниках.

В рамках текущих задач мы оценили защитное, профилактическое действие  микрофилярицида на клинически здоровых собаках, которые не давали положительного ПЦР теста на дирофиляриоз.

Рис. 2. Результаты патологоанатомической экспертизы

За годовое исследование в опытной группе была подсчитана эффективность обработки животных Гельмимакс® в разрешенной дозе 0,25 мг/кг ежемесячно. Эффективность Гельмимакс® равна 100/101 = 100 % по ПЦР, и дополнительно эффективность методом Кнотта оценена как 101/101 = 100 % при повторном анализе образцов крови, взятых от тех же животных для сравнения. Только одна собака из 101 испытуемых демонстрировала положительный результат на дирофиляриоз по методу ПЦР.

В группе контроля с препаратом Дирофен® таблетки мы получили расхождение.

Эффективность Дирофен® таблетки: 95/102 = 93,13 % в течение 12 месяцев наблюдения в режиме ежеквартальной обработки животных.

В контрольной группе 7 собак, не получавших микрофилярицида заразились дирофиляриозом в период исследования. Гельмимакс® объективно защищает животных от заражения дирофиляриозом при использовании, согласно инструкции. Среди заразившихся собак, которые не получали микрофилярицида, были метисы, гончая, немецкая овчарка, грейхаунд и среднеазиатская овчарка. Важно отметить, что клинически инвазированность их D.immitis никак не проявлялась, животные были визуально здоровы, имели хороший аппетит и упитанность, признаков сердечной недостаточности не наблюдалось. Во время продолжительного применения таблеток Гельмимакс® у 55 больных животных и, с профилактической целью у 101 здорового, побочных эффектов терапии не установлено. У экспериментальных собак не выявлено нарушений стула, нервных расстройств или изменений поведения. Для собак с подтвержденным диагнозом после окончания основного исследования была дана рекомендация по дальнейшему применению препарата Гельмимакс® из расчета 0,25 мг/кг массы тела ежемесячно с контролем по ПЦР не реже 1–2 раз в год.

Обсуждение

В нашем исследовании эффективность профилактического действия препарата Гельмимакс®, в зависимости от метода обнаружения, достигала 99–100 %. Животные, которые заражались дирофиляриозом в течение 6–9 месяцев исследования, не имели клинических проявлений заболевания. Эффективность микрофилярицидного действия препарата составила 96,15 %. Выживаемость животных с диагнозом дирофиляриоз в ходе наблюдения за 12 месяцев составила 94,5 %. В группе собак, получавших Гельмимакс® в профилактических целях, летальности или выбытия не отмечалось. При многократном введении препаратов Дирофен® таблетки и Гельмимакс® нежелательных реакций и побочного действия в ходе ежемесячных клинических наблюдений не установлено. В патогенезе самого заболевания не установлено четкой половой или породной предрасположенности, однако, чаще микрофилярий находили у молодых животных < 3 лет. При продолжительном течении инвазии клиническая картина сердечной недостаточности постепенно нарастала и характеризовалась появлением анемии, тусклой шерсти, вялости, потерей активности и физической выносливости. В нашем исследовании установлена инвазия не только D.immitis, но и D.repens. Частота выявления D.repens составила 9 из 55 положительных на дирофиляриоз. Состояние животных при использовании микро- филярицидной терапии объективно улучшалось на второй — третий месяц. Применение препарата Дирофен® таблетки не защищало собак от дирофиляриоза. Также, изучая чувствительность методов тестирования животных на наличие у них микрофилярий, ПЦР-диагностика является наиболее точным и клинически оправданным методом детектирования паразита, особенно на ранних этапах заражения у молодых животных.

Выводы

Включение препарата Гельмимакс® в схему лечения собак, больных дирофиляриозом, для контроля выделения микрофилярий позволило с успехом бороться с клиническими проявлениями инвазии, а также получило положительные рекомендации для защиты животных от заражения возбудителями D.immitis и D.repens. Мониторинг микрофиляремии с помощью ПЦР метода является эффективным инструментом для борьбы с дирофиляриозом у молодых собак.

Конфликт интересов

Производителем препаратов Гельмимакс® и «Дирофен® таблетки для ветеринарного применения и спонсором данного исследования является ООО «Апиценна». Решение о публикации результатов научной работы принадлежит разработчику ООО «АПИ-САН».

Библиография

1. Архипов И.А. Дирофиляриоз / И.А. Архипов, Д.Р. Архипова. — Москва: Типография Россельхозакадемии, 2004.–194 с.

2. Беспалова Н. С. Сравнительная характеристика микрофилярицидных свойств препаратов на основе моксидектина и эприномектина при дирофиляриозах собак /Н. С. Беспалова, Т. А. Золотых // Актуальные проблемы и инновации в современной ветеринарной фармакологии и токсикологии: Материалы V междунар. съезда ветеринарных фармакологов и токсикологов. — Витебск: ВГАВМ, 2015. — С. 86–88.

3. Ястреб В.Б. //Сб.мат.науч.конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». -2004. — вып.5.- С. 443–445.

4.  Веденеев С.А. Новые подходы к проблемам лечения и профилактики дирофиляриоза собак / С.А. Веденеев, В.Н. Ямщиков // Актуальные проблемы биологии и ветеринарной медицины мелких домашних животных: Материалы междунар. научно–практической конф. — Троицк: УГАВМ, 2005. — С. 182–186.

5. Винокурова Д.П. Распространение и патоморфология дирофиляриоза у собак и кошек в Краснодарском крае и морфология дирофилярий: автореф. дис….канд. вет. наук: 102 03.02.11; 06.02.01 / Винокурова Диана Петровна. — Ставрополь, 2011.–20 с.

6. Гаркави Б.Л. Распространение дирофиляриоза домашних собак в Краснодаре /Б.Л. Гаркави, Ф.С. Михно // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: Матер. докл. науч. конф. — Москва: ВИГИС, 2002. — Выпуск 3.–С. 91.

7. Золотых Т.А. Дирофиляриоз собак в Воронеже и Воронежской области / Т.А. Золотых, Н.С. Беспалова // Российский паразитологический журнал, 2015.–№ 2. — С. 38–42.

8.  Золотых Т.А. Клинические исследования терапевтической эффективности препарата «Гельмимакс» при гельминтозах собак и кошек / Т.А. Золотых, Е.Н. Канапелько //Вопросы нормативно–правового регулирования в ветеринарии, 2016. — № 2. — С. 139–143.

9.  Ястреб В.Б. //Сб.мат.науч.конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». — 2004. — вып.5.- С. 443–445.

10. Atkins CE. Comparison of results of three commercial heartworm antigen test kits in dogs with low heartworm burdens. J Am Vet Med Assoc. 2003;222:1221–1223. doi: 10.2460/javma.

11. Arther RG, Bowman DD, Slone RL, Travis LE. Imidacloprid plus moxidectin topical solution for the prevention of heartworm disease (Dirofiloria immitis) in dogs. Parasitol Res. 2005;97(Suppl. 1):S76–80.

12.  Bowman DD, Grazette AR, Basel C, Wang Y, Hostetler JA. Pro- tection of dogs against canine heartworm infection 28 days after four monthly treatments with Advantage Multi® for Dogs. Parasit Vectors. 2016;9:12.

13. Bowman DD, Ohmes CM, Hostetler JA, Keil DJ, Settje TL, Charles SD. Efficacy of 10 % imidacloprid + 2.5 % moxidectin topical solution (Advantage Multi® for Dogs) for the prevention of heartworm disease and infection all month long. Parasit Vectors. 2017;10(Suppl. 2):478.

14.  Knott J.I. // Trans. Roy. Soc. Trop. Med. Hyg. — 1939. — V. 33. — P. 191–196.

15. Lok JB, Knight DH, McCall JW, Dzimianski MT, Cleale RM, Wang GT, et al. Six-month prophylactic efficacy of an injectable, sustained- release formulation of moxidectin against Dirofilaria immitis infection: a two-center study. Recent advances in heartworm disease-symposium ʼ01. Batavia: American Heartworm Society; 2001. p. 149–57.

16. Lok JB, Knight DH, Wang GT, Doscher ME, Nolan TJ, Hendrick MJ, et al. Activity of an injectable, sustained-release formulation of moxidectin administered prophylactically to mixed-breed dogs to prevent infection with Dirofilaria immitis. Am J Vet Res. 2001;62:1721–6

17.  McCall JW, Lindemann BA, Porter CA. Prophylactic activity of avermectins against experimentally induced Dirofilaria immitis in dogs. In: Proceedings of the heartworm symposium ʼ80. Edwardsville: Veteri- nary Medicine Publishing Co.; 1980. p. 126–30.

18. McCall JW, McTier TL, Holmes RA, Greene T, Strickland J, Aguilar R. Prevention of naturally acquired heartworm infection in heartworm- negative beagles by oral administration of moxidectin at an interval of either one or two months. In: Proceedings of the Heartworm Symposium ʼ92. Batavia: American Heartworm Society; 1992. p. 169–77.

19. McCall JW, Suprakorndej BS, Donoghue AR, Turnbull RK. Evalu- ation of the performance of canine heartworm antigen test kits licensed for use by veterinarians and canine heartworm antigen tests conducted by diagnostic laboratories. In: Seward LE, Knight DH, editors. Recent Ad- vances in Heartworm Disease Symposium ’01. Batavia, Illinois: American Heartworm Society; 2001. pp. 135–140.

20. Snyder DE, Wiseman S, Bowman DD, McCall JW, Reinemeyer CR. Assessment of the effectiveness of a combination product of spinosad and milbemycin oxime on the prophylaxis of canine heartworm infection. Vet Parasitol. 2011;180:262–6.

Была ли статья полезной?

Да

7 Нет